+86-18986204758
+86-13871367530

Описание продукции Система стрептавидин-биотин (SA-биотин) обладает чрезвычайно высоким сродством связывания (Kd=10⁻¹⁵) и широко применяется в биологических областях. Стрептавидин ковалентно закреплён на поверхности твёрдой фазы-носителя с использованием технологии белкового конъюгирования, чт...
Система стрептавидин-биотин (SA-биотин) обладает чрезвычайно высоким сродством связывания (Kd=10⁻¹⁵) и широко применяется в биологических областях. Стрептавидин ковалентно закреплён на поверхности твёрдой фазы-носителя с использованием технологии белкового конъюгирования, что обеспечивает эффективное связывание биотинилированных антител, нуклеиновых кислот, белков и других молекул-лигандов. Данный продукт изготовлен на основе суперпарамагнитных микросфер с однородным размером и правильной морфологией, что способствует удобному и быстрому захвату целевых молекул и проведению магнитной сепарации. Продукт совместим с автоматизированным оборудованием для высокопроизводительных операций.
(1) Размер микросфер: стандартно 1 мкм, 2 мкм; возможно изготовление на заказ в соответствии с особыми требованиями клиента
(2) Высокая монодисперсность по размеру, межпартионный CV < 5%, что гарантирует стабильные и надёжные характеристики
(3) Различные типы магнитных микросфер: карбоксильные (COOH), тозильные (Tosyl), стрептавидиновые (Streptavidin, SA) и другие, удовлетворяющие различным сценариям применения
(4) Высокая стабильность: отсутствие окислительного изменения окраски и утечки магнитного ядра при длительном хранении
(5) Суперпарамагнитные свойства и высокий магнитный отклик, сокращающие время операций и повышающие эффективность извлечения образцов
(6) Хорошая суспендируемость, диспергируемость и ресуспендируемость
(7) Хорошая физико-химическая стабильность, обеспечивающая воспроизводимость результатов
| Название проекта | Артикул товара | поверхностные группы | Размер частиц | концентрация | Цена | Области применения |
| Mag-SA | BY-M1000S | стрептоавелин(SA) | 1000nm | 10mg/ml | ¥800/ml | Химическое свечение, молекулярная диагностика |
| BY-M2000S | стрептоавелин(SA) | 2000nm | 10mg/ml | ¥800/ml | Химическое свечение, молекулярная диагностика |
Если нужные вам поверхностные группы микросфер не указаны в таблице выше, обратитесь к представителю службы поддержки клиентов для заказа индивидуальной версии.
В связи с различиями в размере частиц и концентрации цены на продукцию могут варьироваться. Поэтому подробную информацию о ценах вам предоставит наш представитель службы поддержки клиентов с учетом ваших потребностей.
1. Подготовка перед использованием
1.1 Буферный раствор: ниже приведены ингредиенты, обычно используемые для приготовления буферного раствора; пользователь может регулировать концентрацию солей и pH буферного раствора в соответствии со своими потребностями
1.2 Буфер I (для связывания биотин-меченных нуклеиновых кислот): 10 мМ Tris-HCl (pH 7,5), 1 мМ ЭДТА, 1 М NaCl, 0,01–0,1 % Tween-20
1.3 Буфер II (для использования с биотинилированными антителами/белками): PBS, pH 7,4, с содержанием 0,05 % Tween-20; при необходимости можно добавить 0,01–0,1 % BSA
1.4 Буфер для промывки при хемилюминесценции: пользователь должен приготовить промывочный раствор в соответствии с требованиями и перед использованием довести его до комнатной температуры
1.5 Вихревой генератор
1.6 Ротационный смеситель
1.7 Пипетки и наконечники
1.8 Подходящие центрифужные пробирки
2. Конъюгация с биотинилированной нуклеиновой кислотой
2.1. Поместите флакон с магнитными шариками на вихревой вибратор на 20 секунд для перемешивания и ресуспендирования шариков. С помощью пипетки перенесите 100 мкл магнитных шариков в новую центрифужную пробирку. Поместите центрифужную пробирку на магнитный сепаратор и оставьте на 1 минуту (далее эта операция будет называться «магнитной сепарацией»). С помощью пипетки удалите супернатант и снимите центрифужную пробирку с магнитного сепаратора. Примечание: Пользователь может рассчитать необходимое количество магнитных шариков в зависимости от количества биотинилированных молекул, ориентируясь на данные о загрузке магнитных шариков, указанные в таблице технических характеристик продукта. Рекомендуется добавлять биотинилированные молекулы в количестве, равном 1–2-кратной загрузке магнитных шариков, чтобы обеспечить их насыщение.
2.2. Добавьте 1 мл буфера I в центрифужную пробирку, закройте крышкой и тщательно встряхните для ресуспендирования магнитных шариков. Проведите магнитную сепарацию и удалите супернатант. Примечание: если в пункте 2.1 был взят объем магнитных шариков более 1 мл, добавьте буфера I в том же объеме, что и магнитные шарики.
2.3. Повторите «шаг 2.2» один раз.
2.4. Добавьте 500 мкл биотинированной нуклеиновой кислоты, разбавленной буфером I (так, чтобы концентрация магнитных шариков составила 2 мг/мл), и тщательно встряхните пробирку для ресуспендирования магнитных шариков. Поместите пробирку в ротационный смеситель и перемешивайте при комнатной температуре в течение 30 минут.
2.5. Магнитное отделение: перенести супернатант в новую центрифужную пробирку.
2.6. Промойте магнитные шарики три раза, следуя инструкциям из раздела «Шаг 2.2».
2.7. В соответствии с требованиями последующих экспериментов добавьте подходящий буфер с низким содержанием соли и ресуспендируйте магнитные шарики. На этом этап связывания с биотинилированной нуклеиновой кислотой завершен. Магнитные шарики готовы к дальнейшему использованию.
2.8. Пользователь может рассчитать количество нуклеиновой кислоты, связывающейся с магнитными шариками, путем измерения концентрации нуклеиновой кислоты до и после реакции ((концентрация до реакции – концентрация после реакции) × объем реакционного раствора).
3. В сочетании с технологией биотинилирования антител/белков
3.1 Поместите пробирку с магнитными шариками на вихревой вибратор на 20 секунд для перемешивания и ресуспендирования шариков. С помощью пипетки перенесите 100 мкл магнитных шариков в новую центрифужную пробирку. Проведите магнитную сепарацию, удалите супернатант с помощью пипетки и снимите центрифужную пробирку с магнитного сепаратора. Примечание: Пользователь может рассчитать необходимое количество магнитных шариков в зависимости от количества биотинилированных молекул, ориентируясь на данные о загрузке магнитных шариков в таблице с информацией о продукте. Рекомендуется добавлять биотинилированные молекулы в количестве, равном 1–2-кратной загрузке магнитных шариков, чтобы обеспечить их насыщение. 3.2 Добавьте 1 мл буфера II в центрифужную пробирку, закройте крышкой и тщательно встряхните для ресуспендирования магнитных шариков. Проведите магнитную сепарацию и удалите супернатант. Примечание: если в шаге 3.1 объем взятых магнитных шариков превышает 1 мл, добавьте буфер II в объеме, равном объему магнитных шариков.
3.3 Повторите «шаг 3.2» два раза, чтобы в общей сложности провести три цикла стирки.
3.4 Добавьте 1 мл биотинилированного антитела/белка, разбавленного буфером II (так, чтобы концентрация магнитных шариков составила 1 мг/мл), и тщательно встряхните пробирку для ресуспендирования магнитных шариков. Поместите пробирку в ротационный смеситель и перемешивайте при комнатной температуре в течение 60 минут.
3.5 Магнитное отделение: перенести супернатант в новую центрифужную пробирку.
3.6 Промыть магнитные шарики пять раз, следуя инструкциям из «Шага 3.2».
3.7 В соответствии с требованиями последующих экспериментов добавьте буфер II или другой подходящий буфер и ресуспендируйте магнитные шарики. На этом этап связывания с биотин-меченными антителами/белками завершен. Магнитные шарики готовы к дальнейшему использованию.
4. Порядок проведения иммунодиагностики с использованием химического свечения магнитных микрочастиц
4.1 Приведите концентрацию магнитных шариков к желаемому значению (рекомендуется 0,2–0,8 мг/мл), поместите магнитные шарики на вихревой вибратор на 20 секунд для перемешивания и ресуспендирования. Перенесите 50 мкл магнитных шариков пипеткой в 96-луночный планшет, проведите магнитную сепарацию, удалите супернатант пипеткой и снимите 96-луночный планшет с магнитного сепаратора.
4.2 В каждую лунку добавить 100 мкл биотинилированного захватывающего антитела, тщательно встряхнуть для ресуспендирования магнитных шариков, инкубировать в термостате при 37 °C в течение 15 минут, затем провести магнитную сепарацию, удалить супернатант пипеткой и снять 96-луночный планшет с магнитного сепаратора.
4.3 В каждую лунку добавить 200 мкл промывочного буфера, тщательно встряхнуть для ресуспендирования магнитных шариков, провести магнитную сепарацию, удалить супернатант пипеткой, снять 96-луночную плашку с магнитного сепаратора; повторить этот этап еще 2 раза, в общей сложности проведя 3 промывки.
4.4 В каждую лунку добавить 50 мкл стандартного раствора аналита или исследуемого образца, тщательно встряхнуть для ресуспендирования магнитных шариков, инкубировать в термостате при 37 °C в течение 15 минут, затем провести магнитную сепарацию, удалить супернатант пипеткой и снять 96-луночную плашку с магнитного сепаратора.
4.5 В каждую лунку добавить 200 мкл промывочного буфера, тщательно встряхнуть для ресуспендирования магнитных шариков, провести магнитную сепарацию, удалить супернатант пипеткой, снять 96-луночную плашку с магнитного сепаратора; повторить этот этап еще 2 раза, в общей сложности проведя 3 промывки.
4.6 В каждую лунку добавить 100 мкл фермент-меченного антитела, тщательно встряхнуть для ресуспендирования магнитных шариков, инкубировать в термостате при 37 °C в течение 15 минут, затем провести магнитную сепарацию, удалить супернатант пипеткой и снять 96-луночную плашку с магнитного сепаратора.
4.7 В каждую лунку добавить 200 мкл промывочного буфера, тщательно встряхнуть для ресуспендирования магнитных шариков, провести магнитную сепарацию, удалить супернатант пипеткой, снять 96-луночную плашку с магнитного сепаратора; повторить этот этап еще 2 раза, в общей сложности проведя 3 промывки.
4.8 В каждую лунку добавить 150 мкл раствора субстрата, тщательно встряхнуть для ресуспендирования магнитных шариков, инкубировать в темноте в течение 5 минут.
4.9 Поместить 96-луночную плашку в хемилюминесцентный анализатор для считывания показаний и провести соответствующую обработку данных.
1. Следует избегать таких действий, как замораживание магнитных шариков.
2. Чтобы уменьшить потери магнитных шариков, продолжительность каждой операции магнитной сепарации должна составлять не менее 1 минуты.
3. Перед извлечением магнитных шариков из пробирки их следует тщательно встряхнуть для равномерного перемешивания. Во время работы следует избегать образования пузырьков.
4. Рекомендуется использовать пипетки и пробирки высокого качества, чтобы избежать потерь, связанных с прилипанием магнитных шариков и раствора.
5. Размер биотинизированных молекул влияет на объем загрузки магнитных шариков. Пользователю необходимо определить объем загрузки магнитных шариков для конкретных биотинизированных молекул в зависимости от условий эксперимента.
6. Количество добавляемых биотин-конъюгированных молекул должно в 1–2 раза превышать загрузку магнитных шариков, чтобы обеспечить их насыщение.
7. Для отделения биотина от магнитных шариков SA можно использовать следующие методы: метод 1: 0,1 % SDS, кипячение в течение 5 мин; метод 2: pH = 8,2, 10 мМ ЭДТА с 95 % ацетамида, 5 мин при 65 °C или 2 мин при 90 °C. Степень отделения составляет 95 %.
8. Данный продукт предназначен исключительно для исследовательских целей.